Fura-8™, AM
產(chǎn)品概述
分子量 951.90 | 解離常數(shù)(Kd, nM) 260 | 激發(fā)(納米) 354 | 發(fā)射(納米) 524 |
盡管Fura-2已成為shou選的激發(fā)比鈣指示劑,但它具有一定的局限性(例如,靈敏度低于單波長(zhǎng)鈣指示劑,如Fluo-8®和Cal-520®)。為了解決這些問題,亞洲空運(yùn)中心Bioquest投入了大量精力開發(fā)Fura™ 8,這是一種高親和力比例鈣指示劑,具有更高的靈敏度和更高的信噪比。Fura 8的熒光發(fā)射紅移到更長(zhǎng)的可見光波長(zhǎng),便于通過普通濾光片組檢測(cè)Fura™™ 8。Fura™ 8,AM是膜通透性的,在355nm和415nm處激發(fā),在530nm處發(fā)射。
熒光顯微鏡
興奮 呋喃 2 過濾器套件
排放 呋喃 2 過濾器套件
推薦板 黑色墻壁/透明底部
熒光酶標(biāo)儀
興奮 355, 415
排放 530
近路 475
推薦板 黑色墻壁/透明底部
儀器規(guī)格 底部讀取模式/可編程液體處理
儲(chǔ)備溶液的制備
除非另有說明,否則所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣,并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
呋喃-8™ AM 儲(chǔ)備液
在高質(zhì)量無水DMSO中制備2至5 mM的Fura-8™ AM儲(chǔ)備溶液。
實(shí)驗(yàn)方案樣本
以下是我們推薦的將AM酯加載到活細(xì)胞中的方案。此協(xié)議僅提供指南,應(yīng)根據(jù)您的特定需求進(jìn)行修改。在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中制備細(xì)胞過夜。
第二天,將1X Fura-8™ AM工作溶液添加到細(xì)胞板中。
注意如果您的化合物干擾血清,請(qǐng)?jiān)谏蠘尤玖现坝眯迈r的 HHBS 緩沖液替換生長(zhǎng)培養(yǎng)基。
將裝載染料的板在37°C的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育30至60分鐘。
注意孵育染料超過 1 小時(shí)可以改善某些細(xì)胞系的信號(hào)強(qiáng)度。
用您選擇的HHBS或緩沖液(含有陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抑制劑,如1 mM丙磺舒,如果適用)替換染料工作溶液,以去除任何多余的探針。
根據(jù)需要添加興奮ji,并使用配備Fura 2濾光片組的熒光顯微鏡或包含可編程液體處理系統(tǒng)(如FlexStation)的熒光板讀數(shù)器在Ex/Em下同時(shí)測(cè)量熒光1= 355/530 nm 截止值 475 nm 和防爆/電磁2= 415/530 nm 截止值 475 nm。
產(chǎn)品詳情
名稱 Fura-8™, AM
編號(hào) AAT-21055
品牌 aatbio