抗凝血酶III(ATIII)是單鏈糖蛋白,分子量為58,000。它是絲氨酸蛋白酶抑制劑(絲氨酸蛋白酶抑制劑)超家族的成員,被認(rèn)為是凝血級聯(lián)反應(yīng)中重要的抑制劑(1,2)。ATIII抑制廣泛的絲氨酸蛋白酶,包括凝血酶,因子IXa,Xa和XIa,激肽釋放酶,纖溶酶,尿激酶,C1酯酶和胰蛋白酶。抑制機(jī)制涉及在蛋白酶的活性位點和ATIII的易斷裂鍵(Arg 385-Ser 386)之間形成穩(wěn)定的1:1復(fù)合物。凝血酶的活性位點絲氨酸已顯示與ATIII的P1氨基酸(Arg 385)形成共價中間體。肝素可不同程度地提高ATIII對絲氨酸蛋白酶的抑制率。如果是凝血酶抑制劑或Xa因子抑制劑,在肝素存在下,與ATIII的相互作用增強(qiáng)了3個數(shù)量級。ATIII與肝素之間的相互作用涉及肝素上的硫酸化和非硫酸化單糖單元的*序列,以及ATIII上的關(guān)鍵賴氨酸殘基。已經(jīng)證明了ATIII與血管內(nèi)皮上的類肝素結(jié)構(gòu)的結(jié)合,并顯示出增強(qiáng)了對因子IXa,Xa和凝血酶的抑制。
ATIII也可以在補體級聯(lián)反應(yīng)中起作用。已經(jīng)證明了ATIII與血清中的液相補體攻擊復(fù)合物的結(jié)合。另外,補體的S蛋白(膜攻擊復(fù)合物的抑制劑)干擾ATIII /凝血酶的相互作用。
通過肝素-瓊脂糖親和色譜法從新鮮的冷凍血漿中制備ATIII(3)。純化的蛋白質(zhì)以50%(體積/體積)的甘油/水的形式提供,應(yīng)儲存在-20°C下。通過SDS-PAGE分析確定純度。