抗凝血酶III的域結(jié)構(gòu)抗
凝血酶III包含三個鏈內(nèi)二硫鍵(-SS-),富含碳水化合物的域(CHO),NH2末端肝素結(jié)合域和COOH末端絲氨酸蛋白酶結(jié)合域。
尺寸 | 1毫克 |
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公式 | 50%(vol / vol)甘油/ H 2 O |
分子量 |
存儲 | -20°攝氏度 |
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純度 | 通過SDS-PAGE,> 95% |
復(fù)合 |
含量 | 凝血酶抑制 |
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保質(zhì)期(正確存放) | 12個月 |
化學(xué)式 |
尺寸 | 100微克 |
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公式 | 50%(vol / vol)甘油/ H 2 O |
分子量 |
存儲 | -20°攝氏度 |
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純度 | 通過SDS-PAGE,> 95% |
復(fù)合 |
含量 | 凝血酶抑制 |
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保質(zhì)期(正確存放) | 12個月 |
化學(xué)式 |
抗凝血酶III(ATIII)是單鏈糖蛋白,分子量為58,000。它是絲氨酸蛋白酶抑制劑(絲氨酸蛋白酶抑制劑)超家族的成員,被認(rèn)為是凝血級聯(lián)反應(yīng)中重要的抑制劑(1,2)。ATIII抑制廣泛的絲氨酸蛋白酶,包括凝血酶,因子IXa,Xa和XIa,激肽釋放酶,纖溶酶,尿激酶,C1酯酶和胰蛋白酶。抑制機(jī)制涉及在蛋白酶的活性位點(diǎn)與ATIII的易斷裂鍵(Arg 385-Ser 386)之間形成穩(wěn)定的1:1復(fù)合物。凝血酶的活性位點(diǎn)絲氨酸已顯示與ATIII的P1氨基酸(Arg 385)形成共價(jià)中間體。肝素可不同程度地提高ATIII對絲氨酸蛋白酶的抑制率。如果是凝血酶抑制劑或Xa因子抑制劑,在肝素存在下,與ATIII的相互作用增強(qiáng)了3個數(shù)量級。ATIII和肝素之間的相互作用涉及肝素上的硫酸化和非硫酸化單糖單元的*序列,以及ATIII上的關(guān)鍵賴氨酸殘基。已經(jīng)證明ATIII與血管內(nèi)皮上的類肝素結(jié)構(gòu)結(jié)合,并顯示出增強(qiáng)對因子IXa,Xa和凝血酶的抑制。
ATIII也可以在補(bǔ)體級聯(lián)中起作用。已經(jīng)證明了ATIII與血清中的液相補(bǔ)體攻擊復(fù)合物的結(jié)合。另外,補(bǔ)體的S蛋白(膜攻擊復(fù)合物的抑制劑)干擾ATIII /凝血酶的相互作用。
通過肝素-瓊脂糖親和色譜法從新鮮的冷凍血漿中制備ATIII(3)。純化的蛋白質(zhì)以50%(體積/體積)甘油/水的形式提供,應(yīng)儲存在-20°C下。通過SDS-PAGE分析確定純度。
凝膠 | Novex 4-12%Bis-Tris |
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加載 | 人ATIII,每泳道1 µg |
緩沖 | 拖把 |
標(biāo)準(zhǔn) | 參見BluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa) |
本土化 | 等離子體 | |||||
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血漿濃度 | 150µg /毫升 | |||||
行動方式 | 絲氨酸蛋白酶抑制劑 | |||||
分子量 | 58,000(3) | |||||
消光系數(shù) |
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等電點(diǎn) | 4.9-5.3(5) | |||||
結(jié)構(gòu)體 | 單鏈,三個鏈內(nèi)二硫鍵(Cys 8-Cys 128,Cys 21-Cys95,Cys 239-Cys 422)(4),10%a-螺旋,30-40%b-結(jié)構(gòu),50%無規(guī)卷曲(5 ),易裂鍵(Arg 385-Ser 386) | |||||
碳水化合物百分比 | 9%(5,7) |